多年來對干細(xì)胞的定義不斷進(jìn)行修正,并從不同的層面上來進(jìn)行定義 。目前大多數(shù)生物學(xué)家和醫(yī)學(xué)家認(rèn)為干細(xì)胞是來自于胚胎、胎兒或成人體內(nèi)具有在一定條件下無限制自我更新與增殖分化能力的一類細(xì)胞,能夠產(chǎn)生表現(xiàn)型與基因型和自己完全相同的子細(xì)胞,也能產(chǎn)生組成機(jī)體組織、器官的已特化的細(xì)胞,同時還能分化為祖細(xì)胞 。
間充質(zhì)干細(xì)胞是干細(xì)胞的一個研究分支,干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制和多向分化能力的細(xì)胞,它們可以不斷地自我更新,并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成人體組織或器官的細(xì)胞。干細(xì)胞是機(jī)體的起源細(xì)胞,是形成人體各種組織器官的始祖細(xì)胞。
一類存在于多種組織(如骨髓、臍帶血和臍帶組織、胎盤組織、脂肪組織等),具有多向分化潛力,非造血干細(xì)胞的成體干細(xì)胞。這類干細(xì)胞具有向多種間充質(zhì)系列細(xì)胞(如成骨、成軟骨及成脂肪細(xì)胞等)或非間充質(zhì)系列細(xì)胞分化的潛能,并具有獨(dú)特的細(xì)胞因子分泌功能,細(xì)胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究,以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。
間充質(zhì)干細(xì)胞的特性
1.對塑料的黏附的,細(xì)胞具有貼壁依附性。
2.特異性表面抗原表達(dá)-陽性和陰性的標(biāo)記物。
3.多能分化,在體外可以分化成成骨,脂肪和軟骨細(xì)胞。
間充質(zhì)干細(xì)胞的用途
1.神經(jīng)系統(tǒng)
間充質(zhì)干細(xì)胞分泌組作為神經(jīng)源性生態(tài)位調(diào)節(jié)劑∶ 可揭示基本原理和治療機(jī)會。
2.骨骼系統(tǒng)
間充質(zhì)干細(xì)胞用于控制骨關(guān)節(jié)炎∶最新技術(shù)和展望。
3.肝臟
間充質(zhì)干細(xì)胞用于肝臟修復(fù)的治療前景。
4.心臟
間充質(zhì)干細(xì)胞來源的炎性成纖維細(xì)胞可介導(dǎo)衰老心臟的間質(zhì)纖維化。
5.肺
間充質(zhì)干細(xì)胞來源的微泡在肺疾病中的作用。
6.腎臟
間充質(zhì)干細(xì)胞與慢性腎動脈狹窄。
7.胰腺
使用間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞制備替代β細(xì)胞∶ 展望和未來努力方向。
8. 腫瘤免疫治療
改造間充質(zhì)干細(xì)胞可為消除腫瘤生長提供持續(xù)濃度的高效特異性抗體。
間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)實驗
試劑:Gibco基礎(chǔ)培養(yǎng)基,Gibco胎牛血清,75%酒精
耗材:Nest 50ml離心管,Nest 10ml血清移液管,Nest T225透氣蓋細(xì)胞培養(yǎng)瓶 ,Nest 20μl吸頭
設(shè)備:離心機(jī),水浴鍋,培養(yǎng)箱,移液槍,細(xì)胞計數(shù)儀,顯微鏡
準(zhǔn)備:將胎牛血清按比例適當(dāng)加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,配制成完全培養(yǎng)基。
實驗步驟:
1. 從-196°C液氮罐取出1支間充質(zhì)干細(xì)胞凍存管。
2. 即刻將凍存管置入37°C水浴鍋中勻速擺動,持續(xù)一分鐘左右,使直到管中只剩下最后一片結(jié)晶(注意:不要讓水沒過產(chǎn)品管)。
3. 用酒精擦拭管口。
4. 取20ml完全培養(yǎng)基加入離心管中,將融化好的細(xì)胞懸液加入到完全培養(yǎng)基中并充分混勻。
5. 取20ul混勻好的細(xì)胞懸液,用細(xì)胞計數(shù)儀計數(shù)。
6. 細(xì)胞懸液在1400rpm,室溫條件下,離心5分鐘,去上清。
7. 加入10-20ml完全培養(yǎng)基輕輕混勻細(xì)胞。
8. 每個T225細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入50ml完全培養(yǎng)基。
9. 按10 000-15 000個細(xì)胞/cm2接種細(xì)胞,平放搖勻使細(xì)胞分布均勻,在顯微鏡下觀察細(xì)胞分布狀態(tài),放入37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。